Спортивные исследования кордицепс и линчжи

Спортивные исследования кордицепс и линчжи

 

Научно-исследовательский институт

физической культуры и спорта

Республики Беларусь.

Кручинский Николай Генрихович

доктор медицинских наук, доцент Сережкина Т.Е.

кандидат медицинских наук, доцент Королевич М.П.

доктор медицинских наук

г. Минск, Беларусь

Комплексная биологическая оценка

БАД адаптогенного действия «Кордицепс и Линчжи в жидком виде»

 

      Кордицепс китайский (Cordyceps sinensis) является представителем высших грибов и произрастает в Китае, где является традиционным препаратом национальной фитотерапевтической фармацевтики; история его применения насчитывает более 1200 лет. Согласно имеющимся данным, полисахариды кордицепса повышают иммунологическую реактивность организма, обладают системным цитопротекторным эффектом, усиливают сопротивляемость к воздействию неблагоприятных внешних и внутренних факторов [1].

«Кордицепс и Линчжи в жидком виде» содержит: кордицепс -53%, линчжи - 47 %. Препарат является источником полисахаридов, аминокислот, витаминов и минералов, улучшает настроение и повышает работоспособность, увеличивает функциональные способности головного мозга. Исследования лечебных свойств препарата, проведенные в 80-х годах, показали его способность восстанавливать иммунитет (за счет регулирования Т- и В-клеточного иммунитета) и систему кроветворения за счет уникальности сочетания и разнообразия состава (иммуномодулирующих полисахаридов кордицепса, гликозидов, витаминов, минералов и пр.) Линчжи (Ganoderma Lucidum), входящий в состав, также относится к высшим съедобным грибам и обладает иммуномоделирующими и цитопротекторными свойствами [2-12].

 

1.1. Первичная токсикологическая оценка БАД

«Кордицепс и Линчжи в жидком виде»

 Определение острой токсичности

       К 1 мл среды, содержащей 10000 инфузорий в стационарной фазе роста, добавляли исследуемую БАД в количестве 100 мг, 200 мг, 400 мг, 800 мг, 1000 мг, 0 (контроль). После внесения исследуемого вещества пробы помещались для инкубации в термостат при 25°С на 4 часа. Через 4 часа производилась оценка результатов: в нативном препарате наблюдали состояние микроорганизмов, в счетной камере подсчитывали число погибших организмов до их фиксации и общее число организмов после фиксации. На основании полученного % летальности рассчитывали следующие токсикологические параметры: ЛД16, ЛД50, ЛД84. 

Определение подострой токсичности.

    К 1 мл среды, содержащей 10000 инфузорий в стационарной фазе роста, добавляли исследуемую БАД в количестве 50 мг, 100 мг, 200 мг, 400 мг, 800 мг, 1000 мг, 1200 мг, 0 (контроль). После внесения исследуемого вещества пробы помещались для инкубации в термостат при 25°С на 24 часа. Через 24 часа производилась оценка результатов: в нативном препарате наблюдали состояние микроорганизмов, в счетной камере подсчитывали число погибших организмов до их фиксации и общее число организмов после фиксации. На основании полученного % летальности рассчиты­вали следующие токсикологические параметры: ЛД_]6, ЛД₅о, ЛД_84.

Регистрация результатов исследования.

Состояние микроорганизмов в нативном препарате

.

     В пробах, содержащих исследуемую БАД, наблюдалась следующая картина интоксикации: концентрация препарата 100 мг/мл в остром эксперименте вызвала ускорение движения инфузорий без видимых морфологических изменений по сравнению с контролем. В пробах с концентрацией 200 и 400 мг/мл инфузории крупные, округлые, с большой выделительной вакуолью, движение их замедлено, «вздрагивание», вращательные движения. В пробах с концентрацией 600 мг/мл инфузории разных размеров, много крупных, округлых, обездвиженных, движение остальных замедлено. В пробах с концентрацией 800 и 1000 мг/мл - инфузории уродливые, разной формы и размеров, темные с большой вакуолью. Движение инфузорий замедленно, есть мертвые и лизировавшие формы.

  В подостром эксперименте в пробе 50 мг/мл инфузории без видимых изменений по сравнению с контролем, 100 мг/мл - более крупные, 200 и 400 мг/мл - более крупные, округлые, движение их ускорено, единичные мертвые и лизировавшие. Дозы препарата 600, 800,  1000 и  1200 мг\мл привели к появлению уродливых форм, большинство инфузорий погибли либо лизировали.

 

               Расчет ЛД 16,  ЛД 50,  ЛД84, Ккум

  Данные, использованные как для расчета основных токсилогических параметров и результаты их расчета приведены в таблицах 1-2.

                                    Таблица 1. - Данные, использованные для расчета основных токсикологических параметров в остром и подостром эксперименте.

 

 

Острый эксперимент		Подострый эксперимент
доза, мг/мл	% летальности	доза, мг/мл	% летальности
600	3	200	10
800	8	800	49
1000	11	1200	84

 

Таблица 2. - Результаты первичной токсикологической оценки БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» на Thetrahymena pyriformis

 

Показатели токсичности	Величина токсичности, мг/мл
ЛД16	1134,12	346,77
ЛД50	1791,91±1,514	783,95±0,131
ЛД84	2449,70	1221,12
К"кум	-	0,44

 

По результатам токсикологической оценки в остром и подостром экспериментах «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» является мало опасным соединением (4 класс опасности) с умеренно выраженными кумулятивными свойствами (3 класс опасности).

 

1.2. Изучение токсичности БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» в хроническом эксперименте.

Разведение БАД для исследования в хроническом эксперименте осуществляли по следующей схеме (табл. 3).

Рабочие растворы готовились в мерных стеклянных пробирках с притертыми пробками; растворителем служила дистиллированная вода. Рабочие растворы и среда вносились в стерильные 50-мл колбочки. Большие количества БАД (4,0; 2,5; 1,0 и 0,1 г) вносились прямо в 50-мл колбочки для инкубирования со стерильной питательной   средой.     После   дополнительной   стерилизации   и охлаждения проб в каждую колбочку вносили по 20000 инфузорий (2000\мл). Пробы помещались в термомтат при 25 градусов С.

 

Таблица 3 - Подготовка проб для определения хронической токсичности  БАД Кордицепс и линчжи в жидком виде. 

 

 мг/млмл   

Таблица токсичности j		3-1 БАД «Ко	Тодготовка   проб для   определения хронической одицепс и Линчжи в жидком виде»
Исходный раствор		Н2О лист., мл	Рабочий раствор		Среда, мл	Пробы, мг/мл	№№ проб
мг/мл	мл
—	4,0	-	-	-	6,0	400	10-1,10-2,10-3
-	2,5	-	-	-	7,5	250	9-1,9-2,9-3
-	1,0	-	-	-	9,0	100	8-1, 8-2, 8-3
-	0?1	-	-	-	9,9	10	7-1, 7-2,7-3
—	0,1	9,9	10	1,0	9,0	1	6-1, 6-2, 6-3
10	1,0	9,9	1	1,0	9,0	101	5-1, 5-2, 5-3
1	0,1	9,0	10-2	1,0	9,0	10-3	4-1,4-2,4-3
10-2	од	9,9	10-4	-	-	-	—
10-4	1,0	9,9	10-5	1,0	9,0	10-6	3-1, 3-2, 3-3
10-5	0,1	9,9	10-7	-	-	-	—
10-7	1,0	9,0	10-8	1,0	9,0	10-4	2-1,2-2,2-3
10-8	од	9,9	10-10	-	-	-	-
10-10	1,0	9,0	10-11	1,0	9,0	10-4	1-1, 1-2,1-3
-	-	-	-	-	10,0	0	К-1,К-1,К-1

Через 24, 48, 72, 96 часов из каждой колбочки в стерильных условиях отбирали по 1 мл пробы, в которых оценивали состояние и осуществляли подсчет организмов.

Регистрация результатов исследования.

 

           Состояние микроорганизмов в нативном препарате.

       При хроническом воздействии на популяцию Т.р. исследуемых концентраций препарата ни одна из них не вызвала 100 % гибели инфузорий. Через 24 часа инкубации концентрации препарата 100, 250 и 400 мг/мл оказали ингибирующее влияние на генеративную функцию инфузорий, снизив её, соответственно на 32, 64 и 74 %. Наиболее неблагоприятное действие на объект оказала самая высокая концентрация исследуемой БАД, 400 мг/мл. В этой пробе через 24 часа инкубации наблюдалось большое количество мертвых и лизировавших инфузорий, выжившие были более крупные, уродливые, неправильной формы, движение их было ускорено по сравнению с контролем. Концентрации препарата от 100 мг/мл до 10'¹² мг/мл не оказали видимого влияния на морфологические параметры и функциональное состояние инфузорий.

Через 48 часов инкубация в пробах с концентрацией препарата 100 и 250 мг\мл генеративная функция инфузорий восстановилась, оставшись сниженной на 33% лишь в пробе с 400 мг\мл исследуемой БАД. В этой пробе, а также в пробе 250 мг\мл, инфузории сохраняли более крупные размеры и неправильную уродливую форму. В остальных пробах морфологические параметры и функциональное состояние инфузорий не отличались от контроля.

 Через 72 и 96 часов инкубации в пробах с концентрацией препарата 250 и 400 мг\мл форма инфузорий нормализовалась, они стали округлыми, хотя и более крупными, чем в контроле, движение ускорилось. Генеративная функция восстановилась полностью. В остальных пробах морфологические параметры и функциональное состояние инфузорий не отличались от контроля.

Расчет ЕД 16,  ЕД 50, ЕД84, Ккум

Данные, использованные для расчета основных токсикологических параметров в хроническом эксперименте, и в результате их расчета приведены в таблицах 4-5.  

 Таблица4. - Данные, и часов спользованные для расчета основных токсикологических параметров в хроническом эксперименте

Логарифмическая роста		Стационарная фаза рота
доза, мг/мл	ЕД, %	доза, мг/мл	ЕД,%
100	12	100	0
250	64	250	0
400	80	400	0

В стационарной фазе БАД в исследуемых концентрациях не проявила хронической токсичности и кумулятивных свойств (Kg^l).

 

     Таблица 5. - Результаты определения токсичности БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» на Thetrahymena pyriformis в хроническом эксперименте

Показатели	Величина токсичности, мг/мл
токсичности	Логарифмическая фаза	Стационарная фаза
ЕД16	26,00	—
ЕД50	214,80±2,388	_
ЕД84	403,60	_
Ккvm cronica	-	>1

 

По результатам токсикологической оценки в хроническом эксперименте БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» обладает невыраженными кумулятивными свойствами (4 класс опасности).

 

      1.3 Изучение биологического (адаптогенного) действия и мембранотропных свойств БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» в хроническом эксперименте.

1.3.1 Анализ фазовых изменений процессов роста популяции Т.р. при воздействии БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде».

         Фазовые изменения процессов роста популяции Т.р. являются отражением фазовых изменений в процессах метаболизма одноклеточных организмов под влиянием исследуемого препарата. Эти изменения выявляются при проведения анализа основных показателей жизнедеятельности популяции, таких как скорость роста, число поколений и время генерации (таблица 6).

 

Таблица 6. - Основные параметры жизнедеятельности Thetrahymena pyriformis в среде, содержащей БАД «Кордицепс и Линчжи жидком виде»

 24487296

БАД, мг/мл	Время инкубации в часах
Мгновенная скорость роста
0	0,076±0,0073		0,081±0,0013		0,060±0,011		0,047±0,0014
10-12	0,072±0,0027		0,074±0,0005**		О,О53±О,ООО9**		0,041 ±0,0003*
10-9	0,068±,0024		0,071±0,014**		0,050±0,0007**		0,042±0,0009*
10-6	0,066±0,057		0,070±0,0006**		0,051±0,0011**		0,041 ±0,0009*
10-3	0,072±0,0038		0,076±0,0027		0,055±0,0007*		0,043±0,0002*
10-1	0,066±0,0015		0,073±0,0052		0,059*0,0052		0,049±0,0054
1	0,074±0,0024		0,076±0,0020*		0,052±0,0004**		0,045±0,0002
10	0,072±0,0146		0,079±0,0006		0,058±0,0014		0,047±0,012
100	0,060±0,0064		0,084±0,0007		0,067±0,0011*		0,057±0,0002**
250	0,034±0,0084*		0,083±0,0014		0,070±0,0009**		0,061±0,005**
400	0,013±0,0119**		0,071±0,0004**		0,068±0,0003**		0,059±0,0004**
Время генерации
0	9,08±0,919		8,53±О,137		11,48±0,207		14,76±0,448
10-12	9,67±0,364		9,42±0,063**		13,06±0,216**		17,07±0,128**
10-9	10,13±0,346		9,70±0,189**		13,75±0,194**		16,63±0,372*
10-6	10,45±0,974		9,87±0,082**		13,72±0,283**		16,76±0,345*
10-3	9,59±0,524		9,14±0,328		12,71±0,17**		16,30±0,059*
10-1	10,56±0,241		9,59±0,732		11,66± 1,097		14,21 ±1,640
1	9,36±0,318		9,13±0,236		13,44±0,Ю2**		15,41^0,055
10		9,67±3,224		8,76±0,062		12,02±0,292		14,85±0,368
100		11,50±1,258		8,27±0,074		10,32±0Д68*		12,09±0,042**
250		20,51±7,888		8,33±0,137		9,92±0126**		11,44±0Д02**
400		52,24±33,005		9,78±0,055**		10Д2±0,047**		11,71±0,079**
Число поколений
0		2,64±0,253		5,63±0,091		6,27±0,113		6,5О±0Д98
10-12		2,48±0,093		5,10±0,034**		5,51±0,091**		5,62±0,42*
10-9		2,37±0,082		4,95±0,95**		5,54±0,073**		5,77±0Д31*
10-6		2,30±0,197		4,86±0,040**		5,25±0Д10**		5,73±0Д18*
10-3		2,50±0,132		5,25±0,184		5,66±0,076*		5,89±0,021*
10-1		2,27±0,051		5,02±0,357		6Д8±0,541		6,75±0,743
1		2,56±0,084		5,26±0Д38		5,36±0,041**		6,23±,022
10		2,48±0,507		5,48±0,038		5,99±0,148		6,46dbO,161
100		2,09iO,221		5,80±0,052		6,97±0Д13*		7,94±0,027**
250		1,17±0,290*		5,76±0,095		7,26±0,091**		8,39±0,075**
400		0,46±0412**		4,91±0,028**		7Д1±0,033**		8,20±0,055**
Численность популяции
0		12500±2180		9900О±6331		154667±12347		181333±25465
10-12		11167±727		68500±1607**		91333±5812**		98667±2906**
10-9		1ОЗЗЗ±6О1		67667±4045**		75333±3712**		1О9333±1О35О**
10-6		9833±1302		58167±1590**		76000±6000**		106000±8718**
10-3		11333±1014		76167±9528		101333±5457*		118667±1764**
10-1		9667±333		6500ОЫ5158		144667±53646		216000±118145**
1		11833±667		76500±7589		82000±2309**		15000±2309**
10		11167±3167		89167±2333		127333±13532		176667±20342
100		85ОШ323		111667±3930		251333±19642*		490667±9334**
250		4500±866*		108500±7286		306667±18774**		672000±35158**
400		2750±722*		6000Ш155		277000±6351**		587000±22517**
Численность популяции по отношению к контролю, %
0		100		100		100		100
10-12		89.		69		59		54
10-9		83		62		49		60
10-6		79		59		49		58
10-3		91		77		66		65
10-1		77		66		94		119
1		95		77		53		83
10		89		90		82		97
100		68		113		163		271
250		36		ПО		198		371
400		22		61		179		324
Примечание - * р<0,1, ** р<0,05

 

 

      При хроническом воздействии на популяцию Т.р. исследуемых концентраций препарата ни одна из них не вызвала 100% угнетения генеративной функции инфузорий. При этом различные концентрации БАД оказывали разнонаправленное влияние на скорость роста популяции Т.р. Так, малые и близкие к сверхмалым дозы БАД (10-¹², 10-⁹, 10-⁶ мг/мл) оказали умеренное угнетающее влияние на рост популяции на протяжении всего жизненного цикла инфузорий. Концентрация 10-3 мг/мл оказала выраженное угнетающее влияние только в стационарной фазе роста. Концентрация 10-¹, 1 и 10 мг/мл не оказали достоверного влияния на рост инфузорий. Концентрации 100, 250 и 400 мг/мл стимулировали рост инфузорий в стационарной фазе роста, при этом дозы 250 и 400 мг/мл в логарифмической фазе роста проявили угнетающее влияние на рост тест-объекта. Таким образом, малые и сверхмалые концентрации БАД угнетали рост инфузорий и в логарифмической, и в стационарной фазах роста, средние - не оказывали достоверного влияния ни на одну из фаз, пороговые -угнетали рост тест-объекта в логарифмической фазе и стимулировали его - в стационарной фазе роста инфузорий.

 

Анализ фазовых изменений численности популяции Т.р. при воздействии БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде»

 

      Численность популяции, произрастающей в среде, содержащей определенное количество исследуемой БАД, также препарата фазовые колебания по сравнению с контролем, причем эти колебания наблюдались как по мере возрастания концентрации препарата (зависимость «доза-эффект»), так и на каждой отдельной концентрации по мере прохождения популяцией последовательных фаз развития (зависимость «время-эффект»).

Для расчета показателей хронической токсичности БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» проанализировано изменение численности популяции на протяжении жизненного цикла в среде, Содержащей добавку в концентрациях 1,10,100,250 и 400 мг/мл.

В среде культивирования, содержащей БАД в концентрации 1 Мг/мл, численность популяции Т.р. на протяжении всех фаз Жизненного цикла была умеренно сниженной, причем через 72 и 96 часов инкубации - достоверно (95, 77, 53 и 83% от контроля, | соответственно). В среде культивирования с 10 мг/мл БАД Численность популяции Т.р. через 24, 48 и 72 часа не имела достоверных отличий от контроля и составила 89, 90 и 82%  соответственно. Через 96 часов она составила 97% от контроля. Увеличение концентрации исследуемой БАД в среде культивирования Т.р. до 100 мг\мл привело к недостоверному уменьшению численности популяции в лаг-фазе (68%) от контроля и увеличению - в логарифмической фазе (113%), сменившемуся достоверным увеличением скорости роста и численности популяции на последующих этапах жизненного цикла популяции (163 и 271% от контроля, соответственно). БАД , внесенная в среду культивирования Т.р. в концентрации 250 мг\мл, резко снизила генеративную функцию инфузорий в лаг-фазе (численность популяции снизилась до 36%), и повысила - на последующих стадиях жизненного цикла  популяции Т.р.  (110, 198 и 371%, последние два измения достоверны).        Концентрация 400мг\мл снизила численность популяции Т.р. до 22 и 61 % от контроля через 24 и 48 часов, и увеличилась до 179 и 324 % - через 72 и 96 часов (все изменения достоверны). Описанные выше закономерности отображены в таблице 7.

 

 Таблица 7 - Влияние БАД Кордицепс и линчжи в жидком виде на Thetrahymena pyriformis  при хроническом воздействии в сублетальных концентрациях

 

 0 (контроль)110100250400

Показате,ли	Концентрация, мг/мл
	24 часа
Число организмов/мл	12500	12000	11000	8500	4500	2750
% к контролю	100	95	89	68	36	22
Угнетение/стимуляция роста, %	0	-5	-11	-32	-64	-78
48 часов
Число организмов/мл	99000	76500	89000	112000	108500	60000
% к контролю	100	77	90	113	110	61
Угнетение/стимуляция роста, %	0	-23	-10	+13	+10	-39
72 часа
Число организмов/мл	15500	82000	127000	251000	307000	277000
% к контролю	100	53	82	163	198	179
Угнетение/стимуляция роста, %	0	-47	-18	+63	+98	+79
96 часов
Число организмов/мл	181000	150000	177000	491000	672000	587000
% к контролю	100	83	97	271	371	34
Угнетение/стимуляция роста, %	0	-27	-3	+171	+271	+224

 

 

 

       Таким образом, численность популяции Т.р., произраставшей в среде, содержащей исследуемую БАД, претерпела фазные колебания по отношению к ее численности в среде того же состава, но без добавки, как и в зависимости «время-эффект», так и в зависимости «доза-эффект». Ростостимулирующий эффект исследуемой БАД в зависимости «доза-время-эффект» в наибольшей степени выражен для концентрации 100 мг/мл.

 

              1.3.2 Определение МВД, ПТД, ЛД₅о/МНД, Zchronica

Поскольку исследуемая БАД проявляет ингибирующее действие на рост инфузорий в очень низких концентрациях (10-¹²-10-⁶ мг/мл), определение МНД осуществляли на малых и пороговых дозах веществ.

Анализ влияния БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» в малых и пороговых концентрациях на рост популяции Tetrahymena pyriformis показал, что концентрация 10 мг/мл не оказала достоверного влияния на развивающуюся популяцию Tetrahymena pyriformis. Доза 100 мг/мл также не была токсичной, но проявила достоверный ростостимулирующий эффект в стационарной фазе роста популяции. Дальнейшее увеличение концентрации привело к фазовым изменениям скорости роста популяции: резкое угнетение в лаг-фазе и логарифмической фазе, сменившееся стимуляцией в замедленной и стационарной фазах. Таким образом, доза исследуемой БАД, равная 100 мг/мл, является максимальной недействующей, доза 250 мг/мл -пороговой токсической. Результаты расчета МНД, ЛД50/МНД и Zchronica приведены в таблице 10.

   

     1.3.3 Определение адаптогенных и мембранотропных свойств.

Анализ фазовых колебаний численности популяции Т.р. под влиянием БАД «Кордицепс и Линджи в жидком виде», носящих адаптационный характер, и их количественная оценка выявила снижение адаптационного потенциала популяции под действием БАД в концентрациях 1О-¹²-1О-³ и 1 мг/мл и его возрастание - в концентрациях 100, 250 и 400 мг/мл (на 93, 144 и 107% соответственно). В среде культивирования, содержащей БАД в концентрациях 10-¹ и 10 мг/мл, фазы стимуляции и угнетения роста уравновешивали друг друга и коэффициент адаптогенности не носил статистически значимых отличий по отношению к контролю. Наиболее высокий адаптогенный эффект (Кад=2,44) оказала добавка в концентрации 250 мг/мл (таблица 8).

БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» не проявила мембранотропных свойств в концентрациях 10-¹²-100 мг/мл и снизила кислотную резистентность популяции тест-объекта в концентрациях 250 и 400 мг/мл (таблица 8).

 

Таблица 8. - Биологическое действие БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» на Tetrahymena pyriformis в хроническом эксперименте

 

 

«Кордицепс и Линчжи», мг/мл	Коэффициент адаптогенности	Кислотная резистентность
0	1,00 ±0,07	1,00
10 -12	0,60 ±0,01**	1,00
10-9	0,57 ± 0,04**	1,00
10-6	0,56 ± 0,03 **	1,00
10-3	0,69 ± 0,03*	1,00
10-1	0,97 ±0,41	1,00
1	0,72 ± 0,01 *	1,00
10	0,90 ± 0,02	1,00
100	1,93 ±0,06**	1,00
250	2,44 ±0,11**	0,90
400	2,07 ±0,07**	0,80

Таблица 9. - Эффективные дозы БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» по показателю адаптогенности, определенному в хроническом эксперименте

БАД «Кордицепс и Линчжи», мг/мл	Коэффициент адаптогенности	Оценка адаптогенных свойств
100	1,93 ±0,06**	чрезвычайно выражены
250	2,44 ±0,11**	стимулятор
400	2,07 ± 0,07**	стимулятор

Таким образом, по результатам комплексной биологической оценки в остром, подостром и хроническом эксперементах на Tetrahymena pyriformis, БАД «Кордицепс и Линчжи в жидким виде» является малотоксичным препаратом с невыраженными кумулятивными свойствами (4 класс опасности) согласно гигиенической классификации вредных веществ (таблица 10).

 

Таблица 10 - результаты изучения токсичности БАД Кордицепс и линчжи в жидком виде в остором подостром и хроническом эсперименте на Tetrahymena pyriformis

 

 

Показатели токсичности	Величина показателя	Класс опасности по показателям
В остром эксперименте
ЛД]6, мг/мл	1134,12
ЛД5о, мг/мл	1791,91 ±1,514	4
ЛД84, мг/мл	2449,70
В подостром эксперименте
ЛД,6, мг/мл	346,77
ЛД50, мг/мл	783,95 ±0,131
ЛД84, мг/мл	1221,12
КкуМасutа	0,44	3
В хроническом эксперименте (логарифмическая фаза роста)
ЕД|6, мг/мл	26,00
ЕД5о, мг/мл	214,80 ±2,388
ЕД84, мг/мл	403,60
В хроническом эксперименте (стационарная фаза роста)
ЕД,16, мг/мл	-
ЕД5о,мг/мл	—
ЕД84,мг/мл	—
KKyмchronic	>1	4
МНД, мг/мл	10	4
ЛД50/МНД	1,8x10-	4
Zchronica	-	-

 

1.4 Экстраполяция данных токсиколого-гигиенической оценки БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» применительно к использованию в спорте.

 

По результатам токсикологической оценки в остром, подостром и хроническом экспериментах БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» является нетоксичным соединением с невыраженными кумулятивными свойствами (4 класс опасности) согласно гигиенической классификации вредных веществ. Это позволяет широко использовать ее в спортивной практике.

Данные хронического эксперимента позволили определить, что диапазон концентрации от 10 до 100 мг/мл не оказывает негативного влияния на популяцию инфузорий. Концентрация БАД 10 мг/мл не вызвала   достоверных   изменений  скорости   роста   и   численности популяции Т.р., 100 мг/мл - оказала выраженный ростостимулирующий эффект, 250 мг/мл - определена как пороговая токсическая доза. Оптимальной концентрацией для роста популяции Tetrahymena pyriformis является концентрация БАД в среде культивирования 100 мг/мл, для которой характерно достоверное возрастание Кад (1,9±0,06, р<0,01) и отсутствие мембранотоксических свойств (Крез 1,00).

Согласно рекомендациям по применению «Кордицепс и Линчжи в жидком виде», дозы и длительность приема данной БАД могут в широких пределах - от 5 до 180мл в сутки, от нескольких недель до нескольких месяцев, в зависимости от общего состояния, сопутствующих заболеваний, данных лабораторных исследований, целей приема и т.д. Такие дозы не оказали негативного влияния на популяцию тест-объекта, в то же время более высокие дозы БАД резко стимулировали ее рост и размножение. Сложная структура исследуемой БАД, неизвестный химический состав (в аннотации отсутствуют сведения о точном количестве входящих в нее компонентов), а также содержание макронутриентов (белки, полисахариды и др.) позволяют предположить, что выявленные закономерности роста популяции Т.р. в среде культивирование, содержащей БАД «Кордицепс и Линчжи в жидком виде», могут быть объяснены проявлением ее пищевых эффектов. Иными словами, в больших дозах «Кордицепс и Линчжи в жидком виде» выступает не как БАД, а как пищевой продукт, что не позволяет однозначно сделать вывод о ее биологическом действии на популяцию Т.р.

 

ИСТОЧНИКИ

1.   Павлюнина Л.Д. - «Эликсиры здоровья и их применение в онкологии» // Международная компания «Aster» — Смоленск, 2007. - 56 с.

2.   Shi В., Immunoregulatoiy Cordyceps sinensis regulatory T cells to ТЫ 7 cell ratio and delays diabetes in NOD mice / B. Shi [et. al.] // Int Immunopharmacol. - 2009/ - № 9 (5).-p. 582-586.

3.   Li Y., Clinical application of Cordyceps sinensis jn immunosuppressive theraphy in renal transplantation / Y. Li [et. al.] // Transplant Proc. - 2009. - № 41 (5). - p. 1565-1569.

4.   Zhong J.J., Secondary Metabolites from Higher Fungi: Discovery, Bioactivity, and Bioproduction / J.J. Zhong, J.H. Xiao // Adv Biochem Eng Biotechol . - 2009, May [Epub ahead of print].

5.   Cheung J.K., Cordysinocan, a polysaccharide isolated from cultured Cordyceps, activates immune responses in cultured T-lymphocytes and macrophages: signaling cascade and induction of cytokines / J.K. Cheung [et al.] // J Ethnopharmacol. - 2009. -№124(1).-p. 61-68.

6.   Won K.J., Cordycepin attenuates neointimal formation by inhibiting reactive oxygen species - mediated responses in vascular smooth muscle cells in rats / K.J. Won [et al.] // J Pharmacol Sci. - 2009. - № 109 (3). -p. 403-412.

7.   Li C.Y., Two-sided effect of Cordyceps sinensis on dendritic cells in different physiological stages / C.Y. Li [et al.] // J Leukoc Biol. - 2009. - № 85 (6). - p. 987-95.

8.   Zhou   X.,   Cordyceps   fungi:   natural   products,   pharmacological   functions   and developmental products / X. Zhou [et al.] // J Pharm Pharmacol. - 2009. - № 61 (3). -p. 279-91.

9.   Hsu C.H., Effects of the immunomodulatory agent Cordyceps militaris on airway inflammation in a mouse asthma model / C.H. Hsu [et al.] // Pediatr Neonatol. - 2008. -№49 (5). -p. 171-178.

10. Zhou X., Cordicepin is an immunoregulatoiy active ingredient of Cordyceps sinensis / X. Zhou [et al.] //AmJ Chin Med. - 2008. - № 36 (5). - p. 967-980.

11.   Wang X.B., Intervening and therapeutic effect of cordyceps mycelia extract on liver cirrhosis induced by dimethylnitrosamine in rats / X.B. Wang, P. Liu, Z.P. Tang // Zhongguo Zhong Xi Yi Jie He Za Zhi. - 2008. - №28 (7). - p. 618-622.

12. Ji D.B., Antiaging effect of Cordyceps sinensis extract / D.B. Ji [et al.] // Phytother Res. -2009. - № 23 (1). -p.l 16-122.